Питательная среда для выделения и дифференциации E. coli O157 : H7,сухая.
Установлен приоритет по заявке N 97118081
ХАРАКТЕРИСТИКА
Среда предназначена для выделения и дифференциации энтеробактерий, в частности кишечной палочки E.coli О157:Н7, из питьевой и сточных вод, пищевых продуктов, а также из клинического материала по признаку ферментации сорбита. Обладает дифференцирующими и селективными свойствами. Данные свойства обеспечиваются наличием в составе среды сорбита, сульфита натрия и основного фуксина.
СОСТАВ, Г/Л
панкреатический гидролизат рыбной муки
12,0
экстракт пекарных дрожжей
1,0
натрий хлорид
3,4
Д-сорбит
10,0
натрий сульфит
0,8
натрий гидрофосфат
0,5
фуксин основной
0,2
агар
10,0±2,0
рН готовой среды
7,4±0,2
ПРИГОТОВЛЕНИЕ
Препарат в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 2-3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, снова доводят до кипения, охлаждают до температуры 45-50 °С и разливают в стерильные чашки Петри слоем 5-6 мм и оставляют для застывания и подсушивания при температуре 18-25 °С в течение 40-60 мин.
Готовая питательная среда в чашках Петри прозрачная, розового цвета.
Среду необходимо использовать в день приготовления. Хранить до посева в темноте !
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Питательная среда обеспечивает на всех засеянных чашках Петри рост тест-штаммов: Escherichia coli 4 (О157:Н7), Escherichia coli 3912/41 (055: К59), Shigella flexneri 1a 8516, Salmonella typhimurium 79 через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С при посеве по 0,1 мл микробной взвеси каждого тест-штамма из разведения 10-6 разбавленного стерильным 0,9 %-ным раствором хлористого натрия в соотношении 1:1 (условно разведение 10-7).
При визуальном просмотре чашек колонии выглядят следующим образом: E. coli 4 (О157:Н7) в виде круглых прозрачных бесцветных или слабо-розовых колоний диаметром 1,5-2,5 мм; E. coli 3912/41 (055:К59) в виде круглых колоний малинового цвета с неясно выраженным металлическим блеском или без него, диаметром 1,5-2,5 мм; S. flexneri 1a 8516 в виде круглых прозрачных бесцветных или бледно-розовых колоний, диаметром 1,0-1,5 мм. S. typhimurium 79 - в виде круглых колоний малинового цвета с металлическим блеском, диаметром 1,0-2,0 мм
При посеве смеси тест-штаммов E. coli 4 (О157:Н7) и E. coli 3912/41 (055:К59), E. coli 4 (О157:Н7) и S. typhimurium 79 наблюдается их чёткая дифференциация.
Питательная среда полностью подавляет рост Staphylococcus aureus Wood-46 при посеве 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10-1 через 18-20 часов инкубации при температуре (37±1) °С.
ПОСЕВ И ИНТЕПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Взятие и посев инфицированного материала проводят в соответствии с "Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями" (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г. N 535 "Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений", а также по прилагаемой в инструкции на данный препарат схеме выделения и идентификации .
Среда светочувствительна, поэтому все засеянные чашки предохраняют от света.
Через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С проводят учет результатов по наличию колоний энтеробактерий. Сорбитотрицательные энтеробактерии на Сорбитол E. coli O157:H7 агаре образуют прозрачные (полупрозрачные) бесцветные колонии (могут образовывать колонии бледно-розового цвета). Сорбитположительные энтеробактерии образуют колонии малинового цвета с металлическим блеском или без него. Рост грамположительной микрофлоры на среде полностью ингибируется.
